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甘油冷冻保藏法活化(甘油管冷冻保藏方法收集)

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潘伟 主任医师

2024-03-29 01:51:27 1123

甘油冷冻保藏法活化(甘油管冷冻保藏方法收集)

甘油冷冻保藏法活化(甘油管冷冻保藏方法收集)

甘油冷冻保藏法,准备菌种,用冷冻干燥法保藏的菌种,其保藏期可达数年至十数年,为了在许多年后不出差错,故所用菌种要特别注意其纯度,即不能有杂菌污染,然后在较适培养基中用较适温度培养,使培养出良好的培养物。细菌和酵母的菌龄要求超过对数生长期,若用对数生长期的菌种进行保藏,其存活率反而降低。一般,细菌要求2448小时的培养物;酵母需培养3天;形成孢子的微生物则宜保存孢子;放线菌与丝状真菌则培养7-10天。

冷冻干燥保藏法

1、按30%甘油:种子液为1的量加入无菌甘油,混合后分装至事先灭菌的菌种保存管,-70℃或液氮保存。

2、准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造,形状可用长颈球形底的,亦称泪滴型安瓿管,大小要求外径6-7.5mm,长105mm,球部直径9-11mm,壁厚0.6-1.2mm。也可用没有球部的管状安瓿管。塞好棉塞,1.05kg/cm121.3℃灭菌30分钟,备用。冷冻干燥保藏法

3、将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05kg/cm121.3℃灭菌30分钟。准备菌种,用冷冻干燥法保藏的菌种,其保藏期可达数年至十数年,为了在许多年后不出差错,故所用菌种要特别注意其纯度,即不能有杂菌污染,然后在较适培养基中用较适温度培养,使培养出良好的培养物。

4、将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05kg/cm121.3℃灭菌30分钟。将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。

5、加保护剂与灭菌保存细菌、酵母菌或霉菌孢子等容易分散的细胞时,则将空安瓿管塞上棉塞,1.05kg/cm121.3℃灭菌15分钟:若作保存霉菌菌丝体用则需在安瓿管内预先加入保护剂如10%的甘油蒸馏水溶液或10%二甲亚砜蒸馏水溶液,加入量以能浸没以后加入的菌落圆块为限,而后再用1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌15分钟。将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。

甘油冷冻保藏法.

1、§菌种管由传统的玻璃菌种管改为0.5ml带盖塑料离心管。方法:将塑料离心管置耐高压塑料离心管盒内并用双层报纸包好,高压蒸汽15磅15min消毒,放烤箱80℃烤干。在净化工作台内将脱脂牛奶洗下的浓厚菌悬液用长毛细玻璃滴管加到塑料离心管的底部,每只0.2ml左右,切记不要将牛奶污染离心管口。将加好菌液的离心管盒置-20℃冰箱预冻,预冻好后把离心管盒放置到冷冻干燥机干燥箱内冻干。

2、1?了解菌种保藏的基本原理§该改良法优点有:⑴操作过程大大简化,菌种管口不需溶封,不抽真空。

3、2?掌握几种常用的菌种保藏方法。

4、1菌株?

5、2培养基??待保藏的适龄菌株斜面

6、3?试剂肉汤蛋白胨斜面,半固体及液体培养基。

7、4?器具10%HCl无水氯化钙、石蜡油、五氧化二磷。

8、1斜面保藏用于菌种保藏的小试管10*100毫米数支、5毫升无菌吸管、l毫升无菌吸管等、灭菌锅、真空泵、干燥器、冰箱无菌水、筛子40目、120目、标签、接种针、接种环、棉花、牛角匙等等。

甘油冷冻保藏法.

1、根据正面投影图和水平投影图,选出正确的侧面投影图。**

2、下面程序段的输出结果是______。inta=-b=k;k=a++孕育剂起到异质形核的作用,表现为。

3、本章所述的材料奇特的桥有。信息化战争就是依托**化信息系统,使用信息化武器装备及相应作战方法,在陆、海、空、天和**、电磁等空间及认知领域,进行的以体系对抗为主要形式的战争,是信息时代战争的基本形态。

甘油冷冻保藏

1、根据正面投影图和水平投影图,选出正确的侧面投影图。**

2、下面程序段的输出结果是______。inta=-b=k;k=a++孕育剂起到异质形核的作用,表现为。

3、本章所述的材料奇特的桥有。信息化战争就是依托**化信息系统,使用信息化武器装备及相应作战方法,在陆、海、空、天和**、电磁等空间及认知领域,进行的以体系对抗为主要形式的战争,是信息时代战争的基本形态。

此法除适宜于一般微生物的保藏外,对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏,而且性状不变异。缺点是需要特殊设备。

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